Glutamine protects intestine against ischemia-reperfusion injury by alleviating endoplasmic reticulum stress induced apoptosis in rats

Abstract Purpose Glutamine, as an essential part of enteral nutrition and parenteral nutrition agent, has been widely recognized to be a kind of important intestinal mucosa protectant in clinical practice and experimental research. However, the mechanisms of its protective effects are still not fully understand. Consequently, this study aimed to explore the potential mechanism of glutamine on ischemia-reperfusion (I/R) injury induced endoplasmic reticulum (ER) stress in intestine. Methods An experimental model of intestinal I/R in rats was established by 1 hour occlusion of the superior mesenteric artery followed by 3 hours of reperfusion. Morphologic changes of intestinal mucosa, apoptosis of epithelial cells, and expression of intestinal Grp78, Gadd153, Caspase-12, ATF4, PERK phosphorylation (P-PERK) and elF2αphosphorylation(P-elF2α) were determined. Results After I/R, the apoptotic index of intestinal mucosa epithelial cells observably increased with notable necrosis of intestinal mucosa, and the expressions of Grp78, Gadd153, Caspase-12, ATF4, P-PERK and P-elF2αall were increased. However, treatment with glutamine could significantly relieve intestinal I/R injury and apoptosis index. Moreover, glutamine could clearly up-regulate the expression of Grp78, restrain P-PERK and P-elF2α, and reduce ATF4, Gadd153 and Caspase-12 expressions. Conclusion Glutamine may be involved in alleviating ER stress induced intestinal mucosa cells apoptosis.

Ex vivo model of rabbit intestinal epithelium applied to the study of colonization by enteroaggregative escherichia coli / Modelo ex vivo de epitélio intestinal de coelho aplicado ao estudo de colonização por Escherichia coli enteroagregativa

ABSTRACT BACKGROUND The diarrheal syndrome is considered a serious public health problem all over the world and is considered a major cause of morbidity and mortality in developing countries. The high incidence of enteroaggregative Escherichia coli in diarrheal syndromes classified as an emerging pathogen of gastrointestinal infections. After decades of study, your pathogenesis remains uncertain and has been investigated mainly using in vitro models of adhesion in cellular lines. OBJECTIVE The present study investigated the interaction of enteroaggregative Escherichia coli strains isolated from childhood diarrhea with rabbit ileal and colonic mucosa ex vivo, using the in vitro organ culture model. METHODS The in vitro adhesion assays using cultured tissue were performed with the strains co-incubated with intestinal fragments of ileum and colon over a period of 6 hours. Each strain was tested with three intestinal fragments for each region. The fragments were analysed by scanning electron microscopy. RESULTS Through scanning electron microscopy we observed that all strains adhered to rabbit ileal and colonic mucosa, with the typical aggregative adherence pattern of “stacked bricks” on the epithelium. However, the highest degree of adherence was observed on colonic mucosa. Threadlike structures were found in greater numbers in the ileum compared to the colon. CONCLUSION These data showed that enteroaggregative Escherichia coli may have a high tropism for the human colon, which was ratified by the higher degree of adherence on the rabbit colonic mucosa. Finally, data indicated that in vitro organ culture of intestinal mucosa from rabbit may be used to elucidate the enteroaggregative Escherichia coli pathogenesis.

RESUMO CONTEXTO A síndrome diarréica é considerada um grave problema de saúde pública em todo o mundo e é considerada uma das principais causas de morbidade e mortalidade nos países em desenvolvimento. A elevada incidência de Escherichia coli enteroagregativa nas síndromes diarreicas a classificou como um patógeno emergente de infecções gastrintestinais. Depois de décadas de estudo, sua patogênese ainda é incerta e tem sido investigada usando principalmente modelos in vitro de adesão em linhagens celulares. OBJETIVO O presente estudo investigou a interação de cepas de Escherichia coli enteroagregativa isoladas de diarreia infantil com mucosa ileal e colônica de coelho ex vivo, utilizando o modelo de cultura de órgão in vitro. MÉTODOS Os ensaios de adesão in vitro utilizando tecido cultivado foram realizados com as cepas co-incubadas com fragmentos intestinais de íleo e de cólon durante um período de 6 horas. Cada cepa foi testada em três fragmentos intestinais para cada região. Os fragmentos foram analisados por microscopia eletrônica de varredura. RESULTADOS Através da microscopia eletrônica de varredura observamos que todas as cepas aderiram a mucosa ileal e colônica de coelho, com o padrão de aderência agregativo típico de “tijolos empilhados” no epitélio. Entretanto, o maior grau de adesão foi observado na mucosa do cólon. Estruturas filiformes foram encontradas em maior número no íleo em comparação com o cólon. CONCLUSÃO Esses dados mostraram que Escherichia coli enteroagregativa pode ter um maior tropismo para o cólon humano, o que foi ratificado pelo maior grau de aderência na mucosa do cólon de coelho. Finalmente, os dados indicaram que a cultura de órgão in vitro da mucosa intestinal de coelho pode ser utilizado para elucidar a patogênese de Escherichia coli enteroagregativa.

Anatomopathological study of parrot pufferfish Colomesus psittacus parasitized by the aspidogastrean Rohdella sp / Estudo anatomopatológico do peixe baiacu papagaio Colomesus psittacus parasitado pelo aspidogastrea Rohdella sp

Aspidogastrea are globally-distributed parasites of the class Trematoda, which have been described as pathogens of a range of aquatic organisms, in marine and freshwater environments. The principal morphological characteristic of the group is an adhesive ventral disc, which is responsible for fixing the parasite to the host organism. In this study, 112 specimens of Colomesus psittacus from the municipality of Cametá, in the state of Pará (Brazil), were necropsied. Platyhelminthes of the genus Rohdella attached to the mucous membrane of the fish's intestine by the adhesive disc were observed. Fragments of parasitized tissue were fixed in Davidson solution and then processed and stained with hematoxylin-eosin. Other fragments were fixed in glutaraldehyde, processed and observed under a scanning electron microscope. The prevalence of the parasite was 76.4%, mean intensity of infection was 8.0 and mean abundance was 6.2. The parasitism provoked chronic enteritis with diffused inflammatory infiltration. The adherence of the parasite to the mucous membrane of the intestine resulted in strangulation and hyperplasia of the region, as well as causing hypertrophy of the muscle of the mucous membrane. The present study describes the anatomopathological and ultrastructural aspects of the parasitism of the intestine of C. psittacus by Rohdella sp.

Os Aspidogastreas são parasitos da classe Trematoda, distribuídos globalmente e têm sido descritos como patógenos em uma gama de organismos aquáticos de ambientes marinhos e de água doce. A principal característica morfológica do grupo é um disco adesivo na região ventral responsável pela fixação do parasito no organismo hospedeiro. Neste estudo, 112 espécimes de Colomesus psittacus provenientes do município de Cametá, no estado do Pará (Brasil), foram necropsiados. Foram observados platelmintos do gênero Rohdella aderidos à mucosa intestinal através do disco adesivo. Fragmentos de tecido com parasito foram fixados em solução de Davidson e processados e corados em Hematoxilina-Eosina. Outros fragmentos foram fixados em glutaraldeído, processados e observados em microscopia eletrônica de varredura. A prevalência parasitária foi de 76, 4%, intensidade média de infecção de 8,0 e abundância média de 6,2. O parasitismo ocasionou uma enterite crônica com difuso infiltrado inflamatório. A fixação do parasito na mucosa intestinal provocou estrangulamento e hiperplasia da região, bem como hipertrofia da muscular da mucosa. O presente trabalho descreve os aspectos anatomopatológicos e ultra-estruturais da ação parasitária por Rohdella sp. no trato intestinal de C. psittacus.

Evaluation of tee ultrastructure of the small itestine of hiv infected childreen by transmission and scanning electronic microscopy

Objectives To describe HIV children's small intestinal ultrastructural findings. Methods Descriptive, observational study of small intestine biopsies performed between August 1994 and May 1995 at São Paulo, SP, Brazil. This material pertained to 11 HIV infected children and was stored in a laboratory in paraffin blocks. Scanning and transmission electronic microscopy were used to view those intestine samples and ultrastructural findings were described by analyzing digitalized photos of this material. Ethical Committee approval was obtained. Results In most samples scanning microscopy showed various degrees of shortening and decreasing number of microvilli and also completes effacements in some areas. Derangement of the enterocytes was seen frequently and sometimes cells well defined borders limits seemed to be loosened. In some areas a mucous-fibrin like membrane with variable thickness and extension appeared to partially or totally coat the epithelial surface. Fat drops were present in the intestinal lumen in various samples and a bacterium morphologically resembling bacilli was seen in two occasions. Scanning microscopy confirmed transmission microscopy microvilli findings and also showed little “tufts” of those structures. In addition, it showed an increased number of vacuoles and multivesicular bodies inside various enterocytes, an increased presence of intraepithelial lymphocytes, mitochondrial vacuolization and basement membrane enlargement in the majority of samples analyzed. However, some samples exhibited normal aspect. Conclusions Our study showed the common occurrence of various important intestinal ultrastructural alterations with variable degrees among HIV infected children, some of them in our knowledge not described before. .

Objetivos Descrever achados ultra-estruturais do intestino delgado de crianças infectadas pelo HIV. Métodos Estudo descritivo, observacional de biopsias do intestino delgado, realizada entre agosto de 1994 e maio de 1995 em São Paulo - Brasil. Este material pertencia a 11 crianças infectadas pelo HIV e foi armazenado em um laboratório em blocos de parafina. As amostras de intestino delgado foram analisadas por microscopia eletrônica de transmissão e de varredura e achados os achados ultra-estruturais foram descritos por meio da análise de fotos digitalizadas desse material. Foi obtida aprovação pelo Comitê de Ética. Resultados Na maioria das amostras a microscopia de varredura mostrou vários graus de encurtamento e diminuição do número das microvilosidades e até o completo apagamento dessas estruturas em algumas áreas. O desarranjo dos enterócitos foi visto com freqüência e, por vezes, os limites celulares estavam imprecisos. Em algumas áreas uma membrana fibrino-mucosa com espessura e extensão variáveis aparentava revestir parcial ou totalmente a superfície epitelial. Gotas de gordura no lúmen intestinal estavam presentes em várias amostras e bactérias morfologicamente semelhantes a bacilos foram observadas em duas amostras. A microscopia eletrônica de varredura confirmou as observações constatadas nas microvilosidades através da microscopia de transmissão e também mostrou pequenos “tufos” dessas estruturas. Além disso, mostrou aumento do número de vacúolos e de formações multivesiculares dentro de vários enterócitos, aumento da presença de linfócitos intraepiteliais, vacuolização mitocondrial e alargamento da membrana basal na maioria das amostras analisadas. ...

Adherence of enteroaggregative Escherichia coli to the ileal and colonic mucosa: an in vitro study utilizing the scanning electron microscopy / Aderência da Escherichia coli enteroagregativa a mucosas ileal e colônica: estudo in vitro utilizando microscopia eletrônica de varredura

CONTEXT: Enteroaggregative Escherichia coli strains have been associated with persistent diarrhea in several developing countries. In vivo procedures with animal models, in vitro assays with cellular lines and in vitro organ culture with intestinal fragments have been utilized to study these bacteria and their pathogenicity. OBJECTIVE: The present experimental research assessed the pathogenic interactions of three enteroaggregative Escherichia coli strains, using the in vitro organ culture, in order to show the adherence to different regions of both, the ileal and the colonic mucosa and demonstrate possible mechanisms that could have the participation in the prolongation of diarrheiogenic process. METHODS: This study used intestinal fragments from terminal ileum and colon that were excised from pediatric patients undergoing intestinal surgeries and from adult patients that underwent to colonoscopic procedures. Each strain was tested with three intestinal fragments for each region. Tissue was fixed for scanning electron microscopic analysis. RESULTS: These bacteria colonized ileal and colonic mucosa in the typical stacked-brick configuration in the ileum and colon. In both regions, the strains were seen over a great amount of mucus and sometimes over the intact epithelium. In some regions, there is a probable evidence of effacement of the microvilli. It was possible to see adhered to the intestinal surface, bacteria fimbrial structures that could be responsible for the adherence process. CONCLUSION: In order to cause diarrhea, enteroaggregative Escherichia coli strains adhere to the intestinal mucosa, create a mucoid biofilm on the small bowel surface that could justify the digestive-absorptive abnormalities and consequently, prolonging the diarrhea.

CONTEXTO: Cepas de Escherichia coli enteroagregativa têm sido associadas à diarreia persistente em vários países em desenvolvimento. Procedimentos in vivo com modelos animais, cultura de órgão in vitro com fragmentos intestinais e ensaios in vitro com linhas celulares têm sido utilizados para estudar essas bactérias e a sua patogenicidade. OBJETIVO: A presente investigação experimental avaliou as interações patogênicas de três cepas de Escherichia coli enteroagregativa, usando cultura de órgão in vitro, para mostrar a aderência a diferentes regiões do intestino: íleo e cólons e demonstrar possíveis mecanismos que poderiam ter participação na perpetuação do processo diarréico. MÉTODOS: Este estudo usou fragmentos de íleo terminal e cólon que foram retirados de pacientes pediátricos submetidos a cirurgias intestinais e de pacientes adultos que foram submetidos a colonoscopias. Cada cepa foi testada com três fragmentos intestinais para cada região. O tecido foi fixado para análise sob microscopia eletrônica de varredura. RESULTADOS: Estas bactérias colonizaram mucosa ileal e colônica na configuração típica de pilhas de tijolos. Em ambas as regiões, as bactérias foram vistas sobre grande quantidade de muco e, às vezes, sobre o epitélio intacto. Em algumas áreas, há evidência de provável achatamento de vilosidades. Foi possível ver sobre a superfície intestinal, estruturas fimbriais bacterianas que poderiam estar relacionadas ao processo de adesão. CONCLUSÕES: Para causar diarreia, cepas de Escherichia coli enteroagregativa aderem à mucosa intestinal e criam um biofilme de muco sobre a superfície do intestino delgado, o que poderia justificar as anormalidades digestivo-absortivas e, por conseguinte, prolongar a diarreia.

Pathophysiology of enteroaggregative Escherichia coli infection: an experimental model utilizing transmission electron microscopy / Fisiopatologia da infecção pela Escherichia coli enteroagregativa: um modelo experimental utilizando microscopia eletrônica de transmissão

CONTEXT: Enteroaggregative Escherichia coli strains have been associated with persistent diarrhea in several developing countries. In vivo procedures with animal models as rat, rabbit and gnotobiotic piglets intestinal loops, in vitro assays with cellular lines like T84, Caco 2, HT29, HeLa e HEp-2 and in vitro organ culture with intestinal fragments have been applied to study these bacteria and their pathogenicity. OBJECTIVES: The present experimental research assessed the pathogenic interactions of three enteroaggregative Escherichia coli strains, using the in vitro organ culture, in order to observe and compare alterations in different regions of both, the ileal and the colonic mucosa. METHODS: This study applied intestinal fragments from terminal ileum and colon that were excised from pediatric and adult patients that underwent colonoscopic procedures. Tissue was fixed for transmission electron microscopic study. Each bacterium was tested with three intestinal fragments for each region. RESULTS: Enteroaggregative Escherichia coli strains colonized and provoked citotoxic effects in the ileal and colonic mucosa. Total or partial villi destruction, vacuolization of basal cytoplasm of the enterocytes, epithelium detachment, derangement of the structure and epithelial cell extrusion in ileal mucosa could explain the perpetuation of the diarrhea. Bacterial aggregates were seen in intestinal lumen associated with mucus and cellular debris and in the intercellular spaces of the destroyed epithelium, suggesting bacterial invasion that seemed to be secondary to the destruction of the tissue. CONCLUSIONS: Pathogenesis of persistent diarrhea should include alterations in the small bowel structures where the digestive-absorptive functions take place. In the colonic mucosa the inflammatory lesions could explain the occurrence of colitis.

CONTEXTO: A Escherichia coli enteroagregativa está associada à diarréia persistente em vários países em desenvolvimento. Procedimentos in vivo empregando modelos animais como ratos, coelhos e alças intestinais de suínos gnotobióticos, e modelos in vitro com linhas celulares, tais como: T84, Caco 2, HT29, HeLa e HEp-2 e cultura de órgão in vitro são empregados no estudo desta bactéria e de sua patogenicidade. OBJETIVOS: Neste trabalho foram avaliadas as interações de três cepas de Escherichia coli enteroagregativa usando cultura de órgão in vitro, com o objetivo de observar e comparar as alterações em diferentes regiões do intestino: mucosa ileal e mucosa colônica. MÉTODOS: Este estudo empregou fragmentos de íleo terminal e cólon extraídos de pacientes submetidos a colonoscopia. Os fragmentos intestinais infectados in vitro foram fixados para avaliação em microscopia eletrônica de transmissão. Cada cepa bacteriana foi testada com três fragmentos intestinais de cada região. RESULTADOS: As cepas estudadas colonizaram e provocaram efeitos citotóxicos no íleo e no cólon. Alterações na mucosa ileal, tais como: destruição parcial ou total das vilosidades, vacuolização do citoplasma basal dos enterócitos, destacamento do epitélio e desarranjo da estrutura com extrusão de células epiteliais poderiam explicar a perpetuação do processo diarréico. Agregados bacterianos foram vistos no lúmen intestinal associados a muco e restos celulares e nos espaços intercelulares do epitélio destruído sugerindo invasão bacteriana que pareceu ser secundária à destruição do tecido. CONCLUSÃO: A patogênese da diarréia persistente deve incluir alterações no intestino delgado aonde ocorrem as funções digestivo-absortivas. Na mucosa colônica as lesões inflamatórias observadas justificariam a ocorrência de colite.

Mitochondria in the midgut epithelial cells of sugarcane borer parasitized by Cotesia flavipes (Cameron, 1891) / Mitocôndria nas Células Epiteliais do Intestino Médio da Broca-da-cana Parasitada por Cotesia flavipes

The sugarcane borer Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Crambidae) has been controlled by Cotesia flavipes (Hymenoptera: Braconidae); however, very little is known about the effect of the parasitism in the host organs, including the midgut. This work aims to verify mitochondrial alteration in the different midgut epithelial cells of D. saccharalis parasitized by C. flavipes. Midgut fragments (anterior and posterior region) of both non-parasitized and parasitized larvae were processed for transmission electron microscopy. The mitochondria of midgut epithelial cell in the parasitized larvae exhibit morphological alteration, represented by matrix rarefaction and vacuolisation. These mitochondrial alterations are more pronounced in the anterior midgut region during the parasitism process, mainly in the columnar cell.

Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Crambidae), broca da cana-de-açúcar, tem sido controlada por Cotesia flavipes (Hymenoptera: Braconidae); pouco se sabe sobre o efeito do parasitismo nos diferentes órgãos do inseto hospedeiro, principalmente no intestino médio. O objetivo desse trabalho foi verificar as alterações mitocondriais das diferentes células epiteliais do intestino médio de larvas de D. saccharalis parasitadas por C. flavipes. Fragmentos do intestino médio (regiões anterior e posterior) de larvas de D. saccharalis não-parasitadas e parasitadas foram processados para microscopia eletrônica de transmissão. As mitocôndrias das células epiteliais do intestino médio de larvas parasitadas exibem alterações, especialmente rarefação e vacuolização da matriz, que foram mais pronunciadas nas células epiteliais da região anterior do intestino médio na vigência do parasitismo, em especial nas células colunares.

Spherites in the midgut epithelial cells of the sugarcane borer parasitized by Cotesia flavipes

Diatraea saccharalis, the main pest of sugarcane, has been controlled by Cotesia flavipes. Very little is known about the effect of parasitism on the host organs, including the midgut. The Lepidoptera midgut epithelium is composed of columnar, goblet, regenerative, and endocrine cells. Spherites have been described in columnar and regenerative cells of several Lepidoptera species, and presented a lot of functional meaning. We identified spherites in the midgut epithelial cells of non-parasitized D. saccharalis larvae analyzed the effect of parasitism on spherite morphology and distribution along the length of the midgut. Midgut fragments of both non-parasitized and parasitized larvae were processed for transmission electron microscopy. All the midgut epithelial cells showed spherites, but they were not preferentially located in a particular part of the cells. Parasitized larvae had more spherites, mainly in the columnar cells, than non-parasitized larvae. This observation was associated with an ionic imbalance within the insect host. Spherites were more abundant in the anterior midgut region than in other regions, which suggests that this region is involved in ion transport by intracellular and/or paracellular route.The morphological variability of spherites in the cells of parasitized larvae was related to the developmental stages of these structures.

Effects of budesonide and probiotics enemas on the colonic mucosa of rats with experimental colitis

PURPOSE: To investigate the effect of enemas containing probiotics and budesonide on the colonic mucosa in experimental colitis. METHODS: Fifty male Wistar rats with experimental colitis induced by 10 percent acetic acid enema were randomized to five groups (10 rats each) according to the treatment: group 1 - saline solution, group 2 - budesonide (0.75 mg/kg/day), group 3 - probiotics (1mg/day), group 4 - probiotics plus budesonide, and group 5 - control, with not-treated rats. The following variables were studied: body weight, macroscopic and microscopic score of the colonic mucosa, and DNA content of the mucosa. RESULTS: All animals lost weight between the beginning and the end of the experiment (280+ 16 mg versus 249+21 mg, p< 0.001). There was no significant difference among the groups in relation to both the macroscopic and histological score. The budesonide + probiotic group showed higher DNA content than control group (1.24+ 0.15 versus 0.92+ 0.30 mg/100mg of tissue, p=0.01). CONCLUSION: Budesonide in addition to probiotics enhance the mucosal trophism in experimental colitis.

OBJETIVO: Investigar o efeito da administração retal de probióticos e budesonida na mucosa colônica de ratos com colite experimental. MÉTODOS: Cinquenta ratos Wistar com colite experimental induzida pelo ácido acético à 10 por cento foram randomizados em 5 grupos (n=10 por grupo) para diferentes tratamentos: grupo 1 - solução fisiológica; grupo 2 - budesonida (0,75mg/kg/dia); grupo 3 - probióticos (1 g/dia); grupo 4 - probióticos associados a budesonida; e finalmente grupo 5 - controle, composto por ratos sem tratamento. As seguintes variáveis foram estudadas: peso corporal, aspecto macroscópico e microscópico da mucosa e conteúdo de DNA da mucosa colônica. RESULTADOS: Todos os animais perderam peso entre o início e o fim do experimento (280±16 vs 249±21g; p<0.001). Não houve diferença estatística significativa entre os grupos em relação a macroscopia e histologia. O grupo budesonida + probiótico apresentou conteúdo de DNA maior que o grupo controle (1,24±0,15 versus 0,92±0,30 g/100g de tecido; p=0,01). CONCLUSÃO: A associação de budesonida com probióticos acelera o trofismo mucoso na colite experimental.

Glycine reduces tissue lipid peroxidation in hypoxia-reoxygenation-induced necrotizing enterocolitis in rats

OBJETIVO: Avaliar o efeito protetor da glicina, num modelo experimental de ECN. MÉTODOS: Foram utilizados 50 ratos Wistar recém-nascidos, com peso variando de 4 a 6 gramas, provenientes da ninhada de seis ratas. Cinco animais foram canibalizados e, os 45 restantes, foram distribuídos em três grupos: controle G1(n=12); G2(n=16), animais que foram submetidos à hipóxia-reoxigenação; G3(n=17), animais submetidos à hipóxia-reoxigenação após uma infusão intraperitoneal de glicina 5%. Os animais foram submetidos à hipóxia em uma câmara de CO2 recebendo um fluxo de ar contendo 100% de CO2, durante 5 minutos e à reoxigenação recebendo um fluxo de O2 a 100% por 5 minutos. Segmentos de intestino delgado e cólon de 1 cm de extensão foram preparados para análise histológica. O restante do intestino foi removido em bloco e congelado a menos 80°C para homogeneização e dosagem de malondialdeído tecidual (MDA). Classificou-se as lesões teciduais de Grau 0 a Grau 5, de acordo com a extensão da lesão mucosa. RESULTADOS: Os animais do Grupo G1 apresentaram graus de lesão de intestino delgado e cólon significantemente menores do que os animais dos Grupos G2 e G3. O grupo G2 apresentou valores médios de MDA significantemente maiores do que os animais do grupo G1 (p = .015) e G3 (p=0.021). Os animais dos grupos G1 e G3 apresentaram valores de MDA que não diferiram de forma significante (p = 0.992). CONCLUSÃO: A glicina diminuiu os níveis de MDA intestinais (um marcador da peroxidação lipídica) em ratos neonatais submetidos à hipóxia-reoxigenação.

Desnutricão intra-uterina e suas alteracões no intestino delgado de ratos Wistar ao nascimento e após a lactacão / In-uterus malnutrition and its changes in the small bowel of Wistar rats at birth and after lactation

INTRODUÇAO: Os efeitos da desnutricão intra-uterina dependem da fase de desenvolvimento em que está o feto ou o órgão, sendo tanto mais intensos e permanentes quanto mais precocemente ocorrer e mais tarde se iniciar a recuperacão nutricional. OBJETIVOS: Avaliar alteracões no intestino delgado diante da desnutricão intra-uterina e após a lactacão em filhotes de ratas Wistar submetidas à restricão dietética na gestacão e comparar com o grupo controle. MATERIAL E MÉTODOS: As ratas prenhes foram divididas em dois grupos; o grupo controle recebeu dieta ad libitum enquanto o grupo com restricão alimentar recebeu 50 por cento dessa dieta. Ao nascimento as ninhadas foram avaliadas quanto ao número de filhotes e ao peso. Os filhotes foram sacrificados em até 24 horas após o nascimento e avaliados individualmente. Na morfometria do intestino delgado estudou-se: altura total da mucosa, altura da vilosidade, espessura da vilosidade e altura do enterócito. Após a lactacão as mesmas medidas foram realizadas e comparadas entre os grupos. RESULTADOS: Ao nascimento, o peso individual, o comprimento do corpo e o do intestino foram menores no grupo com restricão alimentar. Tais resultados mantiveram-se após a lactacão, exceto o comprimento do corpo, que se mostrou semelhante nos dois grupos. A morfometria observou-se, após o nascimento, que todas as variáveis estudadas foram significativamente menores no grupo de filhotes de mães com restricão alimentar. Após a lactacão houve recuperacão da espessura da vilosidade, porém as demais variáveis permaneceram menores. DISCUSSAO E CONCLUSÕES: A restricão de 50 por cento da dieta materna durante a gestacão leva a baixo ganho de peso e produz conceptos menores, com menor comprimento do intestino em relacão a grupo controle e morfometria microscópica revelando medidas menores estatisticamente significativas. A maioria dessas alteracões se mantém após a lactacão e apresenta uma correlacão positiva com o peso dos animais.

Alteraciones ultraestructurales en la mucosa del colon de ratas tratadas con nifurtimox / Ultrastructural alterations in colonic mucosa of nifurtimox treated rats

El nifurtimox (Nfx) es un fármaco empleado en el tratamiento del Mal de Chagas agudo que ha evidenciado en su uso clínico y en estudios experimentales efectos colasterales tóxicos que comprometen su empleo. Estos efectos fueron correlacionados con la nitrorreducción del Nfx a radical nitroanión y la generación de aniones superóxidos a través de un ciclo redox. El objetivo de este trabajo fue verificar si después de la administración oral de Nfx ( 100g/ kg-1) a rata macho Sprague Dawley se observan alteraciones ultraestructurales en el colon. Los resultados mostraron que 24 horas después de administrar el Nfx se observan alteraciones consistentes en una dilatación moderada del retículo endoplasmático y en una dilatación intensa del Complejo de Golgi en las células epiteliales colónicas. El Nfx está presente en el tejido colónico 1 y 3 horas después de su administración oral, en concentraciones de 9.7 + o - 2.9 y 7.0 + o - nmol/g-1 respectivamente. Los estudios de actividad nitrorreductásica del Nfx, espectrofotómetricos y por HPLC, en fracciones subcelulares, permiten establecer su presencia en la fracción microsomal, con valores de 0.72 + o - 0.29 y 0.26 + o - 0.04 nmol Nfx/min-1/mg-1 proteína , pero no en el citosol. Los resultados una correlación entre la localización del año observado y la fracción celular donde ocurre la nitrorreducción. El daño intenso del complejo de Golgi producido por el Nfx sugiere potenciales alteraciones en las funciones de síntesis y/o almacenamiento de productos de secreción de la mucosa colónica.

Disruption of the intestinal barrier and bacterial translocation in an experimental model of intestinal obstruction

Clinical evidence and the use of experimental models in laboratory animals indicate that the intestine is a reservoir of microorganisms that can cause systemic infection in the human. The purpose of this work was to study the possible effect of intestinal obstruction (IO) on the mechanical and chemical barriers that bring protection against microorganisms crossing from the intestinal lumen towards the systemic tissues. We demonstrated that 24 hours after IO, histological and ultrastructural alterations do occur, seriously compromising the structure of the intestinal barrier in 100 per cent of the studies animals. Likewise, it was observed that during the same period, microorganisms translocation from intestine to the peritoneal cavity and liver (100 and 80 per cent respectively) occurred. The lungs were spared. Changes observed in the intestinal epithelium are related to a process similar to that produced by intestinal ischemia: mitochondrial destruction, with subsequent decrease of its capacity to supply eb

Efecto de la sacarina de sodio en el intestino grueso del raton / Sodium saccharin effect in the mice large intestine

Se ha comprobado que la sacarina de sodio es un promotor tumoral del epitelio de la vegija de rata, propiedad no demostrada en el ser humano y actualmente discutida. En este trabajo se describen las alteraciones que produce este edulcorante en el epitelio del colon descendente de ratones cepa C3H, cuando es adicional al alimento en bajas dosis. Se muestra por microscopia electrónica de transmisión, que la sacarina de sodio produce en las células absortivas del epitelio del colon un pleomorfismo microvellositario constituido por microvellosidades de diferente forma, longitud, diámetro y curvatura.

Estudio morfométrico de biopsia de intestino delgado / Biopsy morphometric study of small intestine

Dentro del estudio clínico de pacientes con malabsorción intestinal se considera la alternativa de practicar una biopsia de intestino delgado. Según algunos autores, el examen histopatológico implica variabilidad interpersonal e intrapersonal, lo cual se corregiría al efectuar estudios morfométricos. En nuestro estudio se muestra el uso de instrumentos de cartografía (curvímetro y planímetro) en la medición de áreas y perímetros, más el uso de índices matemáticos que permiten reagrupar a las biopsias y pacientes en grados diversos de aplanamiento vellositario. Asimismo, los resultados permitieron sugerir tres categorías para el índice mocoso (mayor o igual que 3, de 1,6 a 2,9 y menor o igual a 1,5) y tres para el índice perímetro área (mayor o igual a 0,2 de 0,11 a 0,19 y menor o igual a 0,1), con concordancia estadísticamente significativa (coeficiente de Pearson de 0,8084). El análisis morfométrico permitió detectar pacientes en cuya biopsia el grado de alteración era superior al originalmente descrito. Finalmente, se muestra el grado de variabilidad interpersonal del examen de la biopsia con microscopía de luz convencional con valor Kappa global igual a 0,5254 (desde 0,169 para el grado atrofia parcial leve hasta 0,814 para atrofia subtotal). El interés reside en el costo de instalación y funcionamiento de esta técnica, la cual se ubica muy por debajo de los instrumentos tradicionales de morfometría digital

Ultrastructural specialization of intestinal epithelium over Peyer's patches in the bonnet monkey, Macaca radiata.

The follicle associated epithelium (FAE) which separates the lymphoid follicle of Peyer's patch from the gut lumen is known to have specialized cells called M cells or "microfold" cells in man and certain animals. These cells are considered to be involved in antigen uptake and transport. Our light microscopic study of the small intestine of bonnet monkeys suggested the presence of such specialised cells in FAE. We have confirmed the presence of M cells in bonnet monkey FAE having ultrastructural features very similar to those of human M cells.

Anastomoses manual e mecânica do colon realizadas pelos aparelhos de sutura circular: estudo experimental comparativo: III) Aspectos histológicos da cura das anastomoses e microvascularizaçäo / Manual and mechanical colonic anastomosis made with circular suture devices: comparative experimental study: III) Histological aspects of healing of anastomosis and microvascularization

Referem alguns autores que as suturas mecânicas do intestino cicatrizam de modo mais perfeito e rápido que as manuais, o que se deveria a vários fatores, incluindo uma melhor e mais rápida regeneraçäo vascular; e menor reaçäo inflamatória por utilizaçäo de material de sutura inerte. De um lote de 55 cäes operados para avaliaçäo de vários parâmetros escolhemos, aleatoriamente, um grupo de 32 animais, para estudos histológicos e de revascularizaçäo das anastomoses. Em cada animal realizaram-se três anastomoses do cólon esquerdo: uma manual, num plano, a pontos separados e extramucosos de Dexon 3/0; uma mecânica pelo aparelho EEA; e outra mecânica pelo aparelho SPTU. Os estudos histológicos fizeram-se depois do processamento das peças por técnica histológica clássica, aos 3§, 7§, 14§, 21§, 28§, 45§ 75§ dias.O estudo da macrovascularizaçäo foi objeto de publicaçäo anterior. Para o estudo da microvascularizaçäo utilizou-se a técnica da microangiografia, sacrificando os animais ao 7§, 14§, 21§, 45§ e 75§ dia; a da microscopia eletrônica de varredura, com ensaio ao 14§ dia. Os resultados obtidos pelas várias macro e microvasculares foram coincidentes, sendo a revascularizaçäo nas suturas mecânicas, em especial na EEA, mais rápida e perfeita que na sutura manual, o que se atribui ao menor traumatismo para a execuçäo das suturas mecânicas. Nos estudos histológicos, e ao contrário do que muitas vezes é referido, as suturas mecânicas mostram uma reaçäo inflamatória significativa e idêntica à sutura manual, em resultado, muito provavelmente, da contaminaçäo da linha de sutura a partir do conteúdo séptico do lume intestinal, facilitada neste tipo de anastomoses por um defeito mucoso mais extenso e persistente do que nas manuais. Por interaçäo destes vários fatores, näo e significativamente diferente a evoluçäo cicatricial dos três tipos de sutura ensaiados (manual, EEA e SPTU), podendo, eventualmente, e em idênticos períodos de tempo, apresentarem as suturas mecânicas um estadio cicatricial mais avançado

A patologia intestinal no calazar: estudo morfológico de 31 fragmentos de mucosa da jejunal, obtidos através de biópsias perorais, de 20 crianças / The pathology intestinal in the kalaazar: morphologic study by means of 31 jejunal biopsies made in 20 children with classical kalazar

No presente trabalho investigou-se o envolvimento da mucosa do intestino delgado na leishmaniose visceral humana, em vinte crianças com calazar. Foram analisados 31 fragmentos de mucosa jejunal obtidos através de biópsia peroral. As alteraçöes morfológicas foram classificadas segundo os critérios de Shenk & klipstein (1968), modificados por Goldgar & Vanderhoof (1986). Verificou-se a frequência e a intensidade do parasitismo de células da mucosa por leishmanias. As alteraçöes morfológicas foram correlacionadas com a intensidade do parasitismo, e comparadas às observadas em crianças com diarréa crônica associada a desnutriçäo e/ou giardíase, mas sem leishmaniose. A imuno-marcaçäo pela técnica da imunoperoxidase indireta com soro anti-leishmânia foi usada para a pesquisa de parasitas e seus antígenos. Para a caracterizaçäo das células do infiltrado inflamatório e suas relaçöes com os parasitas, utilizou-se a microscopia eletrônica de transmissäo. O estudo revelou que 85 por cento das crianças com calazar tinham leishmânias em macrófagos da mucosa intestinal, e que, em mais da metade destas, o parasitismo era intenso. Os mascrófagos densamente parasitados localizavam-se no eixo das vilosidades deformando-as. Houve correlaçäo entre a intensidade deste parasitismo e a intensidade das alteraçöes dos parâmetros morfológicos da mucosa intestinal. A comparaçäo com fragmentos obtidos após tratamento específico mostrou diminuiçäo das alteraçöes associada a reduçäo da intensidade do parasitismo

Estudo morfológico da mucosa de um segmento de colo distal interposto entre cotos de intestino delgado após ressecçäo de oitenta por cento de seu comprimento: estudo experimental, com microscopia eletrônica de varredura, em ratas / Morphological study of the mucosa of a segment of the distal colon interposed between stumps of the small intestine after resection of 80 percent of its length: experimental study, with scanning electron microscopy, in female rats

O objetivo deste trabalho foi verificar em estudo com microscopia eletrônica de varredura, quais as eventuais alteraçöes morfológicas ocorridas na mucosa do intestino, seguindo o modelo experimental sobre a adaptaçäo do colo distal interposto entre cotos de intestino delgado após ressecçäo de oitenta por cento de seu comprimento, em ratos com noventa dias de observaçäo. Foram selecionados segmentos de jejuno, íleo, colo normal de cinco animais de controle e segmentos de jejuno a montante e íleo a jusante do colo interposto e do próprio colo interposto em cinco animais operados. Os resultados mostraram que ocorre um aumento de celularidade em todos os segmentos do grupo operado, com aumento das dimensöes das vilosidades no delgado. No segmento de colo interposto o aumento de celularidade leva alteraçöes do padräo morfológico em relaçäo ao normal, com modificaçöes dos óstios das criptas intestinais, modificaçöes nas características da camada de muco do colo e principalmente surgem formaçöes verrucosas na camada epitelial como projeçöes celulares ou brotos celulares. Embora a camada epitelial do colo interposto sofra modificaçöes, elas porém näo propiciam dados suficientes para denominá-las como "delgadizaçäo"

Food deprivation and intestinal mucosa of rat. A histological and surface-ultra structural study

Thirty adult male albino rats were categorized into 3 groups; namely, a control, a starved and a refer group after starvation. Specimens were taken from the proximal half of the small intestine for histological, photometric, histochemical and electron microscopic scanning studies. The intestinal mucosa of the starved rats revealed a significant decrease in the length of the villi as areas of mucosal ulceration. Re-feeding of the rats for 5 days after 5 days of starvation was associated with a reversal of the previous changes